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耗材專區(qū) EZsepTM MAX固相萃取柱應(yīng)用于牛奶中碘醚柳胺殘留量的檢測(cè)

更新時(shí)間:2024-08-23       點(diǎn)擊次數(shù):150

前言:

碘醚柳胺鹵化水楊酰苯胺類殺吸蟲(chóng)藥,可以抑制蟲(chóng)體線粒體的磷酸化過(guò)程,從而阻止蟲(chóng)體內(nèi)三磷酸腺甙(ATP)的合成,導(dǎo)致蟲(chóng)體能量代謝的活力迅速減弱而死亡,隨著國(guó)內(nèi)驅(qū)蟲(chóng)藥的廣泛應(yīng)用和研究,發(fā)現(xiàn)碘醚柳胺有明顯胚胎毒性,食用含有碘醚柳胺的動(dòng)物性食品會(huì)影響身體健康。

本文參照《動(dòng)物性食品中碘醚柳胺殘留量的測(cè)定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(征求意見(jiàn)稿)》,利用EZsepTM MAX固相萃取柱(60 mg/3mL,貨號(hào):PZ12802凈化樣液,再通過(guò)高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀進(jìn)行檢測(cè),立了一種對(duì)牛奶中碘醚柳胺殘留量進(jìn)行分析方法

 

關(guān)鍵詞:

牛奶,碘醚柳胺,固相萃取

1 實(shí)驗(yàn)過(guò)程

1.1儀器與試劑   

MPREP-SPE08手動(dòng)固相萃取裝置,貨號(hào):PZ0008,北京萊伯帕茲?rùn)z測(cè)科技有限公司;

E.T.氮吹濃縮儀,貨號(hào):C020017,北京萊伯帕茲?rùn)z測(cè)科技有限公司;

4500質(zhì)譜系統(tǒng),SCIEX公司

EZsepTM MAX固相萃取柱(60 mg/3mL,貨號(hào):PZ12802,北京萊伯帕茲?rùn)z測(cè)科技有限公司

冷凍離心機(jī),GL-20G-上海安亭科學(xué)儀器廠  ;  

甲醇(色譜純),購(gòu)自賽默飛世爾科技(中國(guó))有限公司;

乙腈(色譜純),購(gòu)自賽默飛世爾科技(中國(guó))有限公司;

甲酸、氨水三乙胺等化學(xué)品均為分析純或以上規(guī)格,購(gòu)自國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司

1.2   工作液配制

碘醚柳胺標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì):100mg/瓶,購(gòu)自壇墨質(zhì)檢標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心。

碘醚柳胺標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液:取碘醚柳胺標(biāo)準(zhǔn)品適量(相當(dāng)于有效成分約10mg),精密稱取,用乙腈稀釋至10mL容量瓶中,配制成濃度為1000μg/mL的碘醚柳胺標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。

碘醚柳胺標(biāo)準(zhǔn)中間液:移取碘醚柳胺標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液0.1mL,用乙腈稀釋至10mL容量瓶中,配制成濃度為10μg/mL的碘醚柳胺標(biāo)準(zhǔn)中間液。

碘醚柳胺標(biāo)準(zhǔn)使用液:碘醚柳胺標(biāo)準(zhǔn)中間液0.1mL,用乙腈稀釋至10mL容量瓶中,配制成濃度為0.1μg/mL的碘醚柳胺標(biāo)準(zhǔn)使用液。

依次移取0.1μg/mL的碘醚柳胺標(biāo)準(zhǔn)使用液0.02、0.1、0.5、2.0、5.0mL,分別置于10mL容量瓶中用甲醇定容至刻度,得到濃度依次為0.2μg/L、1μg/L、5μg/L、20μg/L、50μg/L的標(biāo)準(zhǔn)系列工作液。

1.3 實(shí)驗(yàn)部分

1.3.1 樣品制備

 取牛奶試樣2g,置于50 mL聚丙烯離心管中,加10.0 mL 1%三乙胺乙腈溶液超聲提取10 min,8000 r/min離心5 min,收集上清液至另一50 mL離心管中,殘?jiān)屑?/span>入8.0 mL 1%三乙胺乙腈溶液,重復(fù)提取一次,合并兩次上清液,用乙腈定容至20 mL,混勻,待凈化。

1.3.2 固相萃取凈化 

EZsepTM MAX固相萃取柱(60 mg/3mL,貨號(hào):PZ128025mL乙腈進(jìn)行活化,取1.3.1待凈化液5.0 mL上樣,上樣結(jié)束后用5mL乙腈淋洗萃取柱,再用5mL 5%甲酸乙腈洗脫萃取柱,收集洗脫液,使用E.T.氮吹濃縮儀45氮?dú)鉂饪s至近干,2.0 mL甲醇渦混勻,過(guò)微孔濾膜后供LC-MS/MS測(cè)定。

1.3.3 LC-MS/MS儀器條件

色譜柱:Kinetex Luna PFP(2.6μm,3*100mm)

檢測(cè)方式:多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM);

流動(dòng)相:A:0.1%氨水水溶液  B: 甲醇

流速:0.3mL/min

進(jìn)樣量:5μL

 

表1流動(dòng)相梯度洗脫表

時(shí)間/min

流動(dòng)相A/%

流動(dòng)相B/%

0

70

30

5

0

100

8

0

100

8.1

70

30

10

70

30

 

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

耗材專區(qū)  EZsepTM MAX固相萃取柱應(yīng)用于牛奶中碘醚柳胺殘留量的檢測(cè) 

圖1 標(biāo)液色譜圖

耗材專區(qū)  EZsepTM MAX固相萃取柱應(yīng)用于牛奶中碘醚柳胺殘留量的檢測(cè) 

2 碘醚柳胺標(biāo)準(zhǔn)曲線

3 結(jié)論 

本實(shí)驗(yàn)使用EZsepTM MAX固相萃取柱(60 mg/3mL,貨號(hào):PZ12802對(duì)牛奶中碘醚柳胺進(jìn)行凈化,通過(guò)高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀進(jìn)行測(cè)定,該方法的加標(biāo)回收率范圍89.6%~95.3%,RSD為2.3%,能夠滿足標(biāo)準(zhǔn)要求。說(shuō)明EZsepTM MAX固相萃取柱(60 mg/3mL貨號(hào):PZ12802能很好的完成方法中的凈化工作,結(jié)果穩(wěn)定、可靠。

參考文獻(xiàn)

[1] 《動(dòng)物性食品中碘醚柳胺殘留量的測(cè)定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(征求意見(jiàn)稿)》


 

 2   加標(biāo)回收率

加標(biāo)濃度μg/kg

回收率(%)

均值

RSD

1

2

3

4

5

6

%

%

20

91.6

91.0

89.9

89.6

90.6

95.3

91.3

2.3

 


 


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